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2021-07-30

中山大學(xué)藥學(xué)院于7月27日發(fā)布通報(bào),該院2021年7月27日發(fā)生一起實(shí)驗(yàn)安全事故,實(shí)驗(yàn)=室在清理通風(fēng)柜時(shí)發(fā)現(xiàn)之前畢業(yè)生遺留在燒瓶?jī)?nèi)的未知白色固體,一博士研究生用水沖洗時(shí)發(fā)生炸裂,炸裂產(chǎn)生的玻璃碎片刺破該生手臂動(dòng)脈血管,送醫(yī)救治傷情得到控制,無(wú)生命危險(xiǎn)。與實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)老師溝通分析,導(dǎo)致炸裂的未知白色固體中可能含有氫化鈉或氫化鈣,遇水發(fā)生劇烈反應(yīng)而炸裂。實(shí)驗(yàn)室的瓶瓶罐罐清洗是科研工作者最日常的工作,但是,如果你并不確定瓶?jī)?nèi)裝的是什么東西,千萬(wàn)不要隨意就拿去清洗!有些化學(xué)品遇水會(huì)發(fā)生...

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2021-07-29

研究人員發(fā)現(xiàn),盡管大腦通過(guò)中腦產(chǎn)生5-羥色胺的神經(jīng)元來(lái)調(diào)節(jié)快感和饑餓感的進(jìn)食,但每種進(jìn)食方式都是由自己獨(dú)立的電路連接的,不影響其他類型的進(jìn)食方式。美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心(CentersforDiseaseControlandPrevention)的數(shù)據(jù)顯示,無(wú)論是由饑餓還是愉悅引起的暴飲暴食,通常都會(huì)導(dǎo)致肥胖。美國(guó)約42%的成年人都患有肥胖癥。一個(gè)由貝勒醫(yī)學(xué)院(BaylorCollegeofMedicine)的研究人員領(lǐng)導(dǎo)的國(guó)際研究小組在動(dòng)物模型上研究了大腦是如何調(diào)節(jié)饑餓或其...

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2021-07-29

基本原理:外源目的DNA與載體分子的連接稱為DNA重組,重組的DNA稱為重組體或重組子。研究中需要克隆或表達(dá)的基因?yàn)橥庠碊NA,載體是指能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞,并在其中進(jìn)行擴(kuò)增或誘導(dǎo)外源基因表達(dá)的工具,其中質(zhì)粒載體最為常用。質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌染色體外具有自我復(fù)制的DNA分子。所有的質(zhì)粒都有復(fù)制子、選擇性標(biāo)志和多克隆位點(diǎn)3個(gè)共同的特性。質(zhì)粒載體的選擇包括載體的大小、載體拷貝數(shù)、多接頭以及篩選插入片段的能力,pcDNA3.1(+/-)是比較常用的真核表達(dá)載體。基本步驟:1、目...

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2021-07-29

CCK8全稱CellCountingKit-8,是一種基于WST-8(化學(xué)名為2-(2-甲氧基-4-硝基苯)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測(cè)試劑盒。其工作原理類似于MTT,在電子耦合試劑存在的情況下,WST-8可以被線粒體內(nèi)的脫氧酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物(formazan)。顏色的深淺與細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)。CCK8法在藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性檢...

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2021-07-28

基本原理細(xì)胞凍存時(shí)保存細(xì)胞的最基本方法,當(dāng)不加保護(hù)劑直接凍存細(xì)胞時(shí),細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水會(huì)形成冰晶,從而引起細(xì)胞死亡。因此,正常情況下凍存細(xì)胞,通常會(huì)向培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑,使用逐步降低溫度的方法,以減少凍存過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)冰晶形成、保護(hù)細(xì)胞。注意事項(xiàng)1、凍存細(xì)胞選擇細(xì)胞增殖旺盛、情況穩(wěn)定、無(wú)污染、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。2、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程必須遵循無(wú)菌操作。3、細(xì)胞凍存液的配方應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的類型進(jìn)行調(diào)整,摸索對(duì)應(yīng)細(xì)胞最適的配方。4、細(xì)胞凍存過(guò)程,降溫速率要小,遵循慢凍原則,可借助程序降溫...

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2021-07-27

41、跑電泳的時(shí)候配的膠總是“縮”是什么原因呢?是有的成分不對(duì)嗎?答:沒(méi)什么問(wèn)題,就是你膠里的水分被蒸發(fā)了。過(guò)夜時(shí)拿保鮮膜包起來(lái),在里面加點(diǎn)水保持濕度就可以了;也可能母液(30%聚丙酰胺)有問(wèn)題,你可以重新配制一份觀察;能夠替換的試劑,盡量換一下,選用好的試劑。42、蛋白質(zhì)的分子量跨度很大,如要分離小21KD,中至66KD,大至170KD,可以一次做好嗎?答:這么廣的分布不好轉(zhuǎn)移,一般建議:21kd和66kd可以一起轉(zhuǎn),12%SDS-PAGE,濕轉(zhuǎn)120mA,45-60min...

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2021-07-27

Westernblot實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題匯總及處理方案。21、想分離的蛋白是分子量200kd的,SDS-PAGE電泳的分離膠濃度多大合適?濃縮膠的濃度又該用多少?這么大分子量的蛋白容易作WesternBlot嗎?答:分離膠用7%,濃縮膠3.5%,200kd的蛋白不好做。22、如果上樣量超載,要用什么方法來(lái)增加上樣量?答:可以濃縮樣品,也可以根據(jù)你的目標(biāo)分子量透析掉一部分小分子蛋白。一般地,超載30%是不會(huì)有問(wèn)題的。如果已經(jīng)超了不少了,而且小分子量的也要,可以考慮加大膠的厚度,...

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